Lou Jacobi Louis Harold Jacobovitch néven született 1913-ban, Torontóban, zsidó családban (öccse, Avrom Jacobovitch ma is rabbiként tevékenykedik). Pályáját színpadi színészként kezdte: 1955-ben debütált a Broadway színpadán az Anna Frank naplója című darabban, majd további kilenc Broadway-drámában játszott, például 1959-ben A tizedikben vagy 1961-ben a Neil Simon-féle Come Blow Your Hornban.
1953-tól kezdődően számos mozifilmben és a tévében is játszott. A színpadi verzió után a nagyvásznon is életre keltette az Anna Frank naplójának egyik szerepét az 1959-es filmdrámában, majd szerepelt az Irma, te édes című 1963-as vígjátékban Jack Lemmon és Shirley MacLaine oldalán és az Arthurban is.
Következő fontosabb filmje 1972-ben Woody Allen őrült szexkomédiája, az Amit tudni akarsz a szexről... volt, de játszott A főnök feleségében, a Ha kedd van, akkor ez megint Belgium című tévéfilmben, az Avalon című filmdrámában és a Nem veszek több csókot című romantikus vígjátékban is.
Utolsó mozifilmje az 1994-es I.Q. - A szerelem relatív volt, melyben Meg Ryan, Tim Robbins és Walter Matthau oldalán Einstein egyik legjobb barátját, Kurt Gödel matematikust formálta meg. Lou Jacobit fent említett öccse és Rae Gold nevű húga gyászolja.
